“相塌陷”来的是如此突然

更新时间：2021-12-27 点击次数：1090

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在疏水作用色谱也就是反相色谱中经常能听到的名词，在实验过程中的表现形式为，对物质没有保留，出峰时间靠前，使得峰之间没有保留。

案例

色谱柱：Ultimate^® XB-C8 21.2×250mm，10μm。

流动相：近似纯水。

第一天

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晚上不进样，由于流动相中没有酸碱等添加剂，清洗自动进样器后关机。

第二天

直接流动相冲洗2倍柱体积进样色谱图：

（中间已经进样过30多针）

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一切正常，由于实现了色谱柱自由，样品也足够干净，为了下周一过来能更快做实验，仍然清洗自动进样器后关机。

周一

平衡2倍柱体积进样：

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出峰异常没有峰，怀疑色谱柱没有平衡好，毕竟过了周末，冲多洗一段时间，出峰正常，但是出峰提前了2分钟几个杂质峰均为分离。

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排查原因：

1、流动相是否弄错了；

2、仪器参数设置是否正常；

3、仪器实际流速是否正常。

均正常后，怀疑色谱柱相塌陷，虽然C8的极性较强，耐受高比例的水甚至纯水，但是毕竟在近纯水的环境中浸泡了48小时，80%乙腈水冲洗5倍柱体积，再进样正常。

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知识点：反相色谱固定相。

例如：C18，C8，PHEYNL等耐受高比例的水甚至是纯水，其实是指在这样的流动相体系中不发生相塌陷，保留时间峰面积等都稳定，不影响日常检测。

在这个案例中，C8键合相在长时间浸泡在近纯水的体系中仍然出现了相塌陷，因此，在较长时间不使用时还是需要用较高比例的有机溶剂水进行冲洗保持。

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