色譜柱擔體(或載體)組成
色譜柱是一種化學惰性的多孔固體顆粒,支持固定液,表面積大, 穩定性好(化學、熱),顆徑和孔徑分布均勻;有一定的機械強度,不易破碎。
(1)擔體的種類和性能:
硅藻土型:紅色硅藻土擔體—強度好,但表面存在活性中心,分離極性物質時色譜峰易拖尾;常用于分離非、弱極性物質。
白色硅藻土擔體—表面吸附性小,但強度差,常用于分離極性物質。
非硅藻土型擔體:
有氟擔體,適用于強極性和腐蝕性氣體的分析;玻璃微球,適合于高沸點物質的分析;高分子多孔微球既可以用作色譜的吸附劑,又可以用作色譜的擔體。
(2)擔體的預處理:除去其表面的活性中心,使之鈍化。
酸洗法(除去堿性活性基團);
堿洗法(除去酸性活性的基團);
硅烷化(消除氫鍵結合力);
釉化處理(使表面玻璃化、堵住微孔)等。
如何儲存色譜柱
1.防止緩沖溶液和水溶液流動相產生微生物,做到流動相用多少配多少,或在水流動相中加200ppm的疊氮鈉以抑制細菌成長(一定當心其毒性和潛在的爆炸性);或在流動相中加20%的有機改性劑,也可抑制微生物生長,有機改性劑還有助于流動相脫氣。
2.盡可能將色譜柱貯存于100%有機溶劑中,避免在緩沖溶液中保存。
3.使用緩沖溶液后的色譜柱,應用15~20倍柱體積的不含緩沖劑的同種水—有機溶劑流動相沖洗色譜柱,后換成100%有機溶劑儲存。
4.避免用純凈水沖洗鍵合致密的C18柱。
5.將色譜柱的兩端用堵頭擰好,以免柱床填料干裂。